Kromatografi, bilimde karışımları ayırmak için kullanılan bir işlemdir. Kromatografinin temel prensibi, farklı büyüklükteki farklı bileşiklerin farklı hızlardaki bariyerlerden geçeceğidir. Yüksek basınçlı sıvı kromatografisinde (HPLC), bileşik, farklı büyüklükteki boncukların bir kolonundan enjekte edilir. Daha küçük bir bileşik, kolondan daha büyük bir bileşikten daha hızlı geçer. Bileşiğin kolondan geçmesi için geçen süre tutma süresidir (RT). Bağıl tutma süresi (RRT), bir bileşiğin RT'sinin bir başkasıyla karşılaştırılmasıdır.
HPLC'deki ana tepe noktasını bulun. Ana pik, çıktıdaki en büyük ve en belirgin pik olacaktır.
Ana pikin RT değerini okuyun. Bu, zirvenin ne zaman başladığı ve ne zaman durduğuna bakarak okunabilir. Tepe 6.5 dakikada başlar ve 9.5 dakikada sona ererse, RT 3 dakikadır.
İlgi doruğunu bulun. Bu, RRT'yi hesaplamak istediğiniz herhangi bir tepe olabilir. Bu zirvenin RT'sini oku. Tepe 1 dakikada başlar ve 2.5 dakikada sona ererse, RT 1.5 dakikadır.
İlgilenilen pikin RRT'sini bulmak için ana pikin RT'si ile ilgilenilen tepenin RT'sini bölün. Bizim durumumuzda bu 1,5 dakika / 3 dakika veya 0,5 olacaktır.