İçerik
Günümüzde çeşitli ekspresyon sistemleri geliştirilmiştir ve bunlar, özellikle rekombinant proteinler elde etmek için ticari olarak çok iyi kurulmaktadır. Kullanılan ekspresyon sistemleri memeli ve böcek kültürlerini, Escherichia coli ve bakterileri içerir. Basillerdeki ifade, kullanılan önde gelen sistemdir. Ferdinand Cohn, 1872'de Bacillus cinsini tanımlayan ilk kişiydi ve bunlar Bacillus subtilis, Bacillus anthracis, Bacillus megaterium ve Bacillus gibi çok sayıda gram-pozitif bakteri türünü içerir.
Bacillus Subtilis
Bacillus subtilis, toprakta yaygın olarak bulunan gram-pozitif bir bakteridir ve organik moleküllerin salgılanması için ideal bir çerçeve haline getiren sadece tek bir zar içerir. Bacillus subtilis, protein üretimi için çekici bir konaktır çünkü hücre dışı enzimleri doğrudan kültür ortamına salgılayabilme özelliğine sahiptir. Aynı zamanda büyük bir boşaltım kapasitesine sahiptir. Bacillus subtilis, interferon, büyüme hormonu, pepsinojen ve epidermal büyüme faktörü gibi salgılanan yabancı proteinlerin kalitesini ve miktarını arttırmak için kullanılmıştır. Bununla birlikte, B. subtilis, salgılanan yabancı proteinleri parçalayan yüksek seviyelerde hücre dışı proteazlar üretir ve salgılar. Bacillus ayrıca B. subtilis sisteminin geniş uygulamasını sınırlayan iyi düzenlenmiş indüklenebilir vektörlerden yoksundur.
Bacillus anthracis
Bacillus anthracis, toprakta yaşayan gram pozitif bir spor oluşturan bakteridir. Bir insan konakçıya girdiğinde, hızlı bir şekilde çoğalabilir ve tovemi ve septisemi içeren bir hastalık olan şarbona neden olabilir. Bacillus anthracis'in olumsuz etkilerinin bir örneği, 2001'de ABD posta sisteminde gösterildiği gibi biyolojik savaşta potansiyel olarak kullanılmasıydı. vejetatif çoğalma sırasında regülatör AtxA tarafından aktive edilir. Bacillus anthracis'in çalışmaları temel olarak en bilinen virülans faktörü, koruyucu antijenlerden (PA) oluşan antraks toksini ile ilişkili genlerin ekspresyonuna odaklanmıştır. Bacillus anthracis'in koruyucu antijeni, mevcut insan aşılarında antraksa karşı koruyucu ana immünojendir.
Bacillus Megaterium
Bacillus megaterium, toprakta bulunan en büyük basillerden biridir. Birçok ekolojik bölgede bulunur çünkü çok çeşitli karbon kaynaklarında yetişir. B. megaterium ekspresyon sistemi, stabil ve yüksek verimli protein üretimi için esnek ve kullanımı kolay bir araç sunar. Bunun birkaç nedeni var; İlk olarak, B. megaterium, yabancı proteinlerin bozulmadan iyi bir klonlanması ve ekspresyonu olmasını sağlayan alkalin proteazlara sahip değildir. İkincisi, bakteri kolayca proteinleri büyüme ortamına salgılar ve üçüncü olarak hücre duvarında endotoksinler bulunmaz. Ekmek endüstrisinde kullanılan amilaz ve antibiyotik yapımında kullanılan penisilin amidaz gibi çeşitli enzimler üretir.
Bacillus Brevis
Bacillus brevis, heterolog proteinleri (yapıdaki farklı proteinler) üretmek için başarıyla kullanılmıştır. Bacillus brevis hakkında pek fazla çalışma yapılmadı, ancak E. coli sistemi tarafından üretildiğinde çözünmeyen çözünebilir proteinler ürettiği bilinmektedir. Aynı zamanda kültürlenmesi ve sterilizasyonu kolay olan güvenli bir ev sahibidir. Kullanımını sınırlayan temel dezavantaj, düşük protein verimidir.