İçerik
HPLC (yüksek performanslı sıvı kromatografisi) ve GC (gaz kromatografisi), bilim adamlarının numunenin ne içerdiğini veya numunedeki molekül konsantrasyonunu belirlemek için numuneleri analiz etmek için kullandıkları iki yöntemdir. Her ikisi de aynı prensibi kullanır, daha ağır moleküller daha hafif olanlardan daha yavaş salınırlar veya akarlar (polarite elüsyon zamanında da bir rol oynar). Fikir aynı olmasına rağmen, GC ve HPLC'nin birçok farklılığı vardır.
Mobil Aşama
Kromatografi ekipmanının mobil fazı, numuneyi makineden geçiren maddedir. HPLC'de mobil faz, numune ile uyumluluğunu sağlamak için bir organik çözücü, ultra saf su ve diğer bileşenlerden oluşan bir sıvıdır. GC mobil faz için gaz kullanır. Kullanılan gazlar analiz edilene bağlı olarak helyum, azot, argon veya hidrojeni içerir.
Kolonlar
Numuneler kromatografi kolonları üzerinde hareket ettikçe, numune ve mobil faz, numunenin bileşenlerinin farklı zamanlarda ayrışmasına neden olan kolon içerikleri ile etkileşime girer. HPLC kolonları tipik olarak sıkıca silika veya farklı karbon zinciri uzunlukları ile paketlenmiş dört ila altı inç uzunluğunda metal veya cam tüplerdir. GC sistemleri, laboratuvar ihtiyaçlarına bağlı olarak çeşitli malzemelerle kaplanmış iç duvarlara sahip sargılı kılcal kolonlara sahiptir. Gerilmiş, GC kolonları 100 feet uzunluğa ulaşabilir.
Örnekler
GC, uçucu bileşikler için (hızlı bir şekilde parçalananlar) kullanılırken, HPLC daha az uçucu örnekler için daha iyidir. Bir örnek tuz içeriyorsa veya bir yük taşıyorsa, GC değil HPLC kullanılarak analiz edilmelidir.
Sıcaklık kontrolü
GC sütunları makine içerisindeki bir fırına yerleştirilmiştir. Numuneler analiz edilirken bir bilgisayar sıcaklığı değiştirir. Sıcaklık ne kadar yüksek olursa, numune o kadar hızlı salınır, ancak çok yüksek sıcaklıklar kötü sonuçlar verir. HPLC kolonları her zaman sabit bir sıcaklıkta (en sık oda sıcaklığında) tutulur.