İçerik
Bakterileri topraktan izole etmek, birçok mikrobiyoloji deneyinde önemli bir ilk adımdır. İzole edildiklerinde, türleri ve toprak ortamındaki işlevleri gibi şeyleri belirlemek için bakteriler daha da analiz edilebilir. Çok az miktarda toprak bile milyonlarca bakteri içerebilir, bu da numuneyi bakterileri izole etmeden önce bir toprak numunesinin seyreltilmesini gerekli kılar.
100 ml ölçün. dereceli silindirde damıtılmış su ve steril bir şişeye ekleyin.
1 gr toprak örneğini tartın ve damıtılmış su şişesine ekleyin.Şişeyi sıkıca kapatın ve çözeltiyi iyice karıştırmak için sallayın.
Steril test tüplerini "10 ^ -3," "10 ^ -4," "10 ^ -5" ve "10 ^ -6" olarak etiketleyin. Pipetlerden birini kullanarak tüplerin her birine 9 ml distile su ekleyin.
Çözeltinin 1 ml'sini yeni bir pipet kullanarak "10 ^ -3" etiketli tüpe şişeye aktarın. Tüpün kapağını kapatın ve çözelti iyice karışana kadar yavaşça döndürün.
"10 ^ -3" test tüpündeki çözeltiden 1 ml yeni bir pipet ile "10 ^ -4" tüpe aktarılır. "10 ^ -4" tüpünü kapatın ve karıştırın. Çözeltiyi "10 ^ -4" tüpünden "10 ^ -5" tüpüne ve sonra "10 ^ -5" tüpünden "10 ^ -6" tüpüne aktarmak için bu yöntemi tekrarlayın.
Her biri "10 ^ -4", "10 ^ -5" ve "10 ^ -6" tüplerinden üç örnek plakalayın. Tüpten 1 ml solüsyonu Petri plağına aktarmak için yeni bir pipet kullanın. Pleyte yaklaşık 15 ml besin agarı eklenir; daha sonra kapağı plaka üzerine koyun ve yavaşça çevirin, böylece agar plakanın tabanını kaplar.
Yeni bir pipet kullanarak Petri kabına 1 ml distile su koyarak bir kontrol plakası hazırlayın. Agar ekleyin; kapağı yerleştirin ve plakayı çevirin.
Agar kuruluncaya kadar Petri plakalarını dik bırakın. Ardından plakaları ters çevirin ve inkübatörde veya oda sıcaklığında 24 saat ve beş güne kadar inkübe edin.
Plakaları, istenen inkübasyon süresinden sonra inkübatörden çıkarın. Bakteriyel kolonileri, yaklaşık 30 ila 300 kolonisi içeren plakalar üzerinde sayın. Aynı kolonileri iki kez saymamak için saymış olduğunuz kolonileri işaretlemek için kalıcı bir işaretleyici kullanın.
Seyreltme sayılan koloni sayısını - "10 ^ -4," "10 ^ -5" veya "10 ^ -6" - her bir plaka için toprak çözeltisini bölün. Her bir sayılama plakasından elde edilen sonuçların ortalamasını alarak, orijinal toprak gramında ekilebilir bakteri sayısını bulun.