İçerik
Çıplak gözle görülememelerine rağmen, bakteriler her yerdedir. Yiyeceklerde, toprakta, suda, evlerimizdeki yüzeylerde ve vücutlarımızda ve vücudumuzda bulunurlar. Bakteriler genellikle karma popülasyonlarda bulunur. Belirli bir bakterinin belirli bir örnekteki diğer bakteri türlerinden izolasyonu, mikrobiyologların yapı ve fonksiyonlarını, tanımlanmasında kullanılan özellikleri incelemelerini sağlar. Mikrobiyologlar bakterileri sıklıkla çeşitli çizgi plaka tekniklerinden birini kullanarak izole ederler.
Araçlar
Mikroorganizmaları transfer etmek için bir aşılama döngüsü kullanılır. Bir ucunda küçük, dairesel bir halka bulunan bir nikrom veya platin telden oluşur. Diğer ucu düzdür ve bir sapa doğru kayar. Tek kullanımlık plastik aşılama döngüleri de mevcuttur. Bakteriler ancak büyürlerse izole edilebilirler. Mikrobiyologlar, agar adı verilen katı bir ortamla doldurulmuş sığ, yuvarlak petri kaplarında çizgi levha izolasyonu için bakteri yetiştirir. Agar, bakterilerin doğal olarak büyüdüğü ortamı taklit eder. Ortam dolu yemekler, istenmeyen organizmaların büyümesini önlemek için steril ve kapaklıdır. Şerit plaka izolasyonu sırasında, aşılama döngüsü bir Bunsen brülörünün alevi içinde tekrar tekrar sterilize edilir.
Prensip
Çizgi levha tekniği, mikroorganizmaların bir karışımını içeren bir numuneden spesifik bakterileri izole etmek için en popüler yöntemdir. Teknik esas olarak organizma sayısını seyreltir ve yoğunluğunu azaltır. Mikrobiyologların bireysel bakteri kolonilerini ayırt etmelerini ve izole etmelerini sağlar. Bir koloni, görünür bir bakteri kümesidir. Tek bir kolonideki tüm bakteriler aynı bakteri hücresinden kaynaklanır. Sonuç olarak, bireysel koloniler “saf” kolonilerdir. Bir tür bakteri içeren saf bir kültür üretmek için saf koloni başka bir plakaya aktarılır.
prosedür
Düzgün bir şekilde yapıldığında, çizgi plaka izolasyonu bir örneği inceler ve ayrı ayrı bakteri hücrelerinin izole koloniler halinde gelişmesini sağlar. Bir mikrobiyolog aşılama döngüsünü bir alevde sterilize ederek başlar. Döngüyü agara dokunarak soğutur, daha sonra döngüyü numuneye daldırır ve plakanın bir bölümünü örtmek için ileri geri yayılır. Döngüyü sterilize eder, soğutur ve bir zikzak hareketi kullanarak ilki ilk bölümden birkaç kez sürükleyerek ve ikinci bölümü kapatarak plakanın ikinci, bitişik bir bölümünü aşılar. Bu, birinci bölümden az sayıda bakteri alır ve bunları ikinci bölüme aktarır. Bu temel prosedürün tekrarlanma sayısı kullanılan çizgi plakası yöntemine bağlıdır. Yönteme rağmen, orijinal numune sadece levhanın ilk bölümünü aşılamak için kullanılır.
Çizgi Plakası Yöntemi
Şerit plaka yöntemleri, çizgili agar bölümlerinin sayısına göre değişir. T-çizgi yöntemi üç bölüm kullanır: üst yarı ve iki eşit boyutta alt bölüm. İlk aşılama, plakanın üst yarısına yerleştirilir. Bakteriler üst kısımdan alt kısımlardan birine, daha sonra alt kısımdan diğerine sürüklenir. Kadran yönteminde dört eşit boyutta bölüm çizilir. Sürekli çizgi çekme yöntemi tipik olarak levhanın üst yarısını aşılamayı, 180 derece döndürmeyi ve önceki bölümden bakteri sürüklemeden ya da bakterileri sürüklemeden plakanın diğer yarısını aşılamayı içerir.