Bir enzim, kimyasal reaksiyonları katalize eden (hızını artıran) bir proteindir. Çoğu enzimin optimal sıcaklığı veya enzimlerin reaksiyonları en iyi şekilde sağladığı sıcaklık, 35 ila 40 santigrat derece arasındadır. Bu pencere içindeki sıcaklığın arttırılması, reaksiyon hızını arttırır, çünkü molekülleri uyarır ve enzimlerin / reaktiflerin çarpışma ve ürün oluşturmak için tepkimeye girme hızını arttırır. Ancak, sıcaklığın çok fazla artması enzimi denatüre edebilir ve çalışmasını engelleyebilir.
Reaksiyonun sınırsız miktarlarda ısıtılması ve reaksiyonun küçük örneklerinin alınmasıyla, maksimum ürün üretme hızının ne zaman ortaya çıktığını belirlemek için optimum enzim sıcaklığını belirleyin.
Bir yöntem seçin. Denemenizdeki çeşitli noktalarda ürününüzün konsantrasyonunu nasıl ölçeceğinizi belirleyin. Örneğin, bir spektrofotometre kullanarak ve absorbanstan gelen konsantrasyonu hesaplayarak veya flüoresansı ölçerek ve flüoresanstan konsantrasyonu hesaplayarak birçok ürünün konsantrasyonunu ölçebilirsiniz.
Denemenizi ayarlayın. Reaktanlarınızı ve enziminizi sintilasyon şişesi gibi bir kapaklı küçük bir kaba yerleştirin. Tepki başlayacaktır. Parıldama şişesini daha büyük bir oda sıcaklığında su kabına yerleştirin. Beheri bir ısıtma plakasına yerleştirin. Beher içine bir termometre yerleştirin. Bu, reaksiyonun sıcaklığını çeşitli noktalarda ölçmenizi sağlar.
Reaksiyonun 100 mikrolitre örneğini oda sıcaklığında, yaklaşık 25 santigrat derece alın. Isıtma plakasını açın. 30 ila 40 derece santigrat (30.5, 31, 31.5, vb.) Arasındaki çeşitli sıcaklıklarda reaksiyonunuzun 100 mikrolitre örneğini alın.
Her sıcaklıkta ürününüzün konsantrasyonunu belirleyin. Sıcaklık 40 derecenin üzerine çıktığında, enzimin denatüre olması nedeniyle substratın ürüne dönüştürülme hızında bir düşüş göreceksiniz. Ürünün maksimum oranda üretildiği nokta, sıcaklığın optimum olduğu noktadır.