ABD Çevre Koruma Ajansı'na göre, LC50 havadaki veya sudaki bir kimyasal maddenin konsantrasyonunu, o havada veya suda yaşayan test hayvanlarının yüzde 50'sinde ölüme yol açması beklenen olarak tanımlanmaktadır. Genellikle fareler veya sıçanlar üzerinde yapılan testlerle, LC50 seviyesinde test hayvanlarının yüzde 50'si bir maruziyetten sonra ölecektir. LC50 değerlerini belirlemek için yapılan testler testte hangi hayvanın kullanıldığını belirtir. Fareler ve sıçanlar üzerindeki toksisite testleri her zaman insanlara yayılmamakla birlikte, LC50 değeri önemlidir ve insanlar malzeme üzerinde çalıştıklarında güvenli tarafta olmak için kullanılır.
Hangi hayvanın test edileceğini, her test grubunda kaç hayvan olduğunu, kimyasalın hangi konsantrasyonlarının test edileceğini ve maruz kalma sürelerini içerecek şekilde test standartlarınızı yazınız.
Bir test hayvanı grubunu kontrollü bir laboratuar ortamında kimyasalın bir konsantrasyonuna maruz bırakın. Kontrol grubu dışındaki tüm gruplar kimyasalın her bir farklı konsantrasyonundan birine maruz kalana kadar devam edin.
LC50 değerini, test hayvanlarının en az yüzde 50'sinin öldüğü, milyon başına kısım (ppm) cinsinden kimyasalın en düşük konsantrasyonu olarak tanımlayın.